Protocolo de extracción de ADN en lotes de 10 mosquitos para la identificación de Plasmodium spp. mediante qPCR / Protocol for DNA extraction in batches of 10 mosquitoes for the identification of Plasmodium spp. thorough qPCR

Las tropas que despliegan en zonas de operaciones endémicas de malaria, necesitan de una información precisa del riesgo sanitario para la toma de decisiones acerca de las medidas de prevención más adecuadas. El estado de portador de un mosquito se determina clásicamente por la presencia o ausencia de esporozoitos de Plasmodium spp. en las glándulas salivales. Los protocolos basados en la amplificación del ADN en tiempo real (qPCR) son muy sensibles, sin embargo existen dificultades en la qPCR debido a inhibidores presentes en los tejidos del mosquito, lo que obliga a trabajar de uno en uno. En este trabajo se diseña una qPCR para amplificar una región conservada entre mosquitos de diferentes especies y otros dípteros, con el objetivo de comparar varios protocolos de extracción de ADN y determinar el más eficiente a la hora de procesar lotes de 10 mosquitos (AU)

Troops deployed in operational areas where malaria is endemic, need accurate information on the health risk for this disease to make decisions about the most appropriate prevention measures. The carrier status of a mosquito is classically determined by the presence or absence of sporozoites of Plasmodium spp. in the salivary glands. Protocols based on DNA amplification in real time (qPCR) are very sensitive, however there are difficulties in qPCR due to inhibitors present in tissues of the mosquito, therefore it is necessary to work one by one. In this paper we design a qPCR to amplify a preserved region among different species of mosquitoes and other Diptera, in order to compare various DNA extraction protocols to determine the most efficient one when processing batches of 10 mosquitoes (AU)

Plan de vigilancia entomológica en zona de operaciones. Aproximación al estudio de anofelinos (Diptera: Culicidae) y riesgo entomológico asociado en las bases de Herat y Qala I Naw / Entomological surveillance program in area of operations: approach to the study of anopheline (Diptera: Culicidae) and entomological risk at the bases of Herat and Qala i Naw

Introducción: Cualquier información obtenida para contribuir a la evaluación del riesgo de aparición de brotes de malaria en la fuerza desplegada en zonas de operaciones es de máximo interés para los servicios de medicina preventiva. Tras un estudio piloto de vigilancia entomológica, realizado en la base de Herat (Afganistán) en 2008, se han realizado ahora nuevos estudios protocolizados y con más medios en dicha base, así como en la situada en Qala i Naw (Afganistán). Material y métodos: Entre junio y octubre de 2010 se realizaron muestreos entomológicos en las bases de Herat y Qala i Naw, empleando trampas luminosas de succión tipo mini CDC con luz blanca y ultravioleta, así como una trampa de succión tipo BG-Sentinel de BioGents GmbH con atrayente químico. Las hembras de anofelinos se analizaron mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en busca de su posible infección por Plasmodium spp. Resultados: Se capturaron culícidos pertenecientes a diversos géneros, entre ellos del género Anopheles. Todas las hembras de anofelinos fueron analizadas mediante PCR a tiempo real, siendo todas negativas a Plasmodium spp. Discusión: Entre los ejemplares capturados, Anopheles hyrcanus es un potencial vector de malaria en la zona. Dada su presencia en la base de Herat, habría que valorar la posible existencia de reservorios de Plasmodium spp. en las zonas habitadas cercanas a la misma, y la influencia de factores externos, tales como los vientos predominantes en esa región, que pueden empujar a los mosquitos infectados hacia la base, desde esas zonas. Con los resultados obtenidos se puede establecer un protocolo sencillo de evaluación del riesgo de padecer malaria detectando mosquitos portadores potenciales (riesgo medio) y reales (riesgo alto) (AU)

Introduction: Any information obtained to contribute to the assessment of the risk of malaria outbreaks in the force deployed in area of operations is of greatest interest to preventive medicine services. Following a pilot study of entomological surveillance, carried out at the base of Herat (Afghanistan) in 2008, further protocolised research was recently performed also in Qala i Naw base. Material and methods: Between June and September 2010 an entomological survey took place at the bases of Herat and Qala i Naw (Afghanistan), using for the purpose CDC traps with white and ultraviolet light, as well as a Sentinel trap type with specific chemical attractant BG-Lure®. The females of Anopheles were analysed with the real-time polymerasa chain reaction (PCR) in order to look for the possible infection with Plasmodium spp. Results: Mosquitoes belonging to various genera were captured. All anopheline females were analysed by real-time PCR and all of them were negative to Plasmodium spp. Discussion: Among the captured specimens, Anopheles hyrcanus is a potential vector of malaria in the area. Due to its presence in the base of Herat, we should assess the possible presence of reservoirs of Plasmodium spp. in inhabited areas close to the base, as well as the influence of external factors, such as prevailing winds in this region that could drive infected mosquitoes toward the base from those areas. With the obtained results we could establish a simple protocol to assess the risk of malaria, detecting potential vectors (medium risk) and real vectors (high risk) (AU)

Muestreo entomológico en zona de operaciones: ensayo piloto en la base de apoyo avanzado de Herat (Afganistán) / Entomological sampling in Area of Operations: pilot survey in Forward Support Base, Herat (Afghanistan)

Introducción. Las enfermedades transmitidas por vectores constituyen un riesgo sanitario de gran relevancia a considerar en la protección sanitaria del personal desplegado en Zona de Operaciones (ZO). En este sentido, una de las enfermedades más preocupantes es el paludismo y en concreto su incidencia en el despliegue de la Fuerza en Afganistán. El objetivo de este trabajo ha sido realizar una aproximación al estudio de posibles vectores del paludismo en la Base de Apoyo Avanzado de Herat en Afganistán. Material y métodos. En octubre de 2008 se realizó un muestreo entomológico en la Base de Apoyo Avanzado de Herat, empleando trampas de luz tipo CDC (Centers for Disease Control). Resultados. Se capturaron diversas especies de culícidos, concretamente Culex pipiens, Uranotaenia unguiculata, Culiseta sp, Anopheles dthali, Anopheles barianensis y Anopheles peditaeniatus .Discusión y conclusiones. Los culícidos no pertenecientes al género Anopheles capturados pueden encontrarse también en Territorio Nacional (TN), y exceptuando la especie Culex pipiens, no tienen relevancia como potenciales vectores de enfermedades. En relación a los anofelinos hallados, sólo uno de ellos, Anopheles dthali aparece citado como vector secundario del paludismo en el vecino Irán. Aunque las tres especies encontradas ya habían sido descritas en Afganistán, no existían referencias de su presencia en la provincia de Herat. Consideramos que este ensayo debe continuarse en el futuro con muestreos entomológicos adecuadamente protocolizados extendiéndose a todas las ZO, y cuyo objetivo final debe ir encaminado a la valoración del riesgo de exposición a patógenos transmitidos por vectores (AU)

Introduction. Vector-borne diseases are a relevant health risk to take into consideration for the health protection of the personnel deployed in the Area of Operations. In relation to the above, one of the most worrying disease is malaria and in particular its effects over the deployment of the Forces in Afghanistan. The purpose of this project is to make an approach to potential malaria vectors in the Forward Support Base (FSB) Herat (Afghanistan). Materials and methods. In October of 2008 an entomological survey was made in the FSB, Herat, using CDC (Centers for Disease Control) light traps. Results. Several Culicidae species were captured, such as Culex pipiens, Uranotaenia unguiculata, Culiseta sp, Anopheles dthali, Anopheles barianensis y Anopheles peditaeniatus. Discussion and conclusions. Captured Culicidae species not belonging to the Anopheles genus can be found also in home nation, and except to Culex pipiens species, they are not relevant as potential vector diseases. In relation to the anophelines species found, only one of them, Anopheles dthali is mentioned as secondary malaria vector in Iran. Although the three species found had already been described in Afghanistan, there were not references regarding their presence in Herat province. We think that this survey should be continued in the future with entomological sampling properly standardized covering all the Area of Operations, and with a final purpose of the risk evaluation of exposure to pathogens transmitted by vectors (AU)

Introducción de mosquitos vectores de enfermedades por medio del tráfico aéreo. Importancia de los sistemas de vigilancia entomológica y su aplicación en las Fuerzas Armadas / Introduction of mosquito disease vectors through air traffic. Importance of the entomological surveillance systems and their application in the Armed Forces

El tráfico aéreo internacional ha jugado históricamente un importante papel en la introducción de organismos vivos en hábitats que les eran ajenos. El caso de mosquitos transmisores de diversas enfermedades no ha sido una excepción y son numerosos los ejemplos acerca de la introducción y establecimiento de mosquitos en diversas zonas del mundo, constituyendo en muchos casos importantes problemas de salud pública. España, por diversas circunstancias, principalmente relacionadas con su situación geográfica puede ser especialmente susceptible a diversas enfermedades transmitidas por mosquitos vectores, por lo que debería tomarse en consideración la importancia de desarrollar adecuados sistemas de vigilancia entomológica, sobre todo en los puntos de entrada a Territorio Nacional (TN), como es el caso de aeropuertos. En el ámbito de las Fuerzas Armadas, dichos sistemas deberían integrarse en programas más amplios de bioseguridad, tales como los que se adoptan en los repliegues y repatriación de personal, material, equipos o vehículos procedentes de las diversas Zonas de Operaciones en las que se hallan desplegados, los cuales se encuentran ya contemplados en Instrucciones Técnicas y diversos Procedimientos (AU)

International air traffic has historically played an important role in the introduction of living organisms in new environments. The case of mosquito disease vectors is not an exception and there are numerous examples of the introduction and settlement of mosquitoes in different areas of the world, in many cases producing serious problems of public health. Spain, due to different circumstances mainly related with her geographical situation, might be especially susceptible to various mosquito-borne diseases. For this reason the development of adequate systems of entomological surveillance should be considered, especially in the points of entry to the national territory, as for instance in airports. In the military environment those systems should be integrated in comprehensive biosecurity programs, as those adopted in redeployments and repatriation of personnel, materiel, equipment or vehicles from the AOR in which they are deployed, as it is already considered in Technical Instructions and diverse Standard Operating Procedures (AU)